Зачем нужно ВПЧ-генотипирование?
ВПЧ является гетерогенным вирусом.
Это означает, что существует множество его форм.
Фактически, это целое семейство вирусов, различных по уровню патогенности.
При заражении разными типами ВПЧ в разной степени увеличивается риск рака, возникают разные симптомы.
Около 40 типов ВПЧ передаются половым путем.
Четырнадцать из них являются вирусами высокого онкогенного риска.
Таким образом, генотипирование используется для того, чтобы узнать: какой тип вируса персистирует у пациента.
Это важно для оценки онкогенного риска.
Ведут пациентов с разными типами ВПЧ совершенно по-разному.
Если с низкоонкогенными вирусами человеку можно удалить бородавки и отправить домой, то обнаружение высокоонкогенных типов требует динамического наблюдения.
Возрастает роль медикаментозной терапии.
Человеку важно избавиться от носительства вируса как можно скорее, чтобы предотвратить предраковые процессы и онкологические заболевания.
ПЦР диагностика папилломавирусов КВАНТ 21
Выявление возбудителя папиллома-вирусной инфекции (Human Papillomavirus), в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени исследуется ДНК вирусов в образце биоматериала.
При этом определяется наличие и количество ВПЧ:
- низкого онкогенного риска (6, 11, 44 типы);
- высокого онкогенного риска (16, 18, 26, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 53, 56, 58, 59, 66, 68, 73, 82 типы).
Метод исследования
Полимеразная цепная реакция (ПЦР).
Формат выдачи результата:
Тип ВПЧ; количество ВПЧ: Lg копий в расчете на 100 000 эпителиальных клеток, Lg копий/образец.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Мазок урогенитальный, мазок урогенитальный (с секретом предстательной железы), ректальный мазок, мазок из ротоглотки.
Как правильно подготовиться к исследованию?
- Женщинам рекомендуется сдавать урогенитальный мазок или мочу до менструации или через 2 дня после ее окончания.
- Мужчинам не следует мочиться в течение 3 часов до сдачи урогенитального мазка или мочи.
Общая информация об исследовании
Вирусы папилломы человека (ВПЧ) широко распространены, поражают эпителий кожи и слизистых оболочек и обладают онкогенным потенциалом. ВПЧ передается при тесном контакте с инфицированным эпителием, поэтому основные пути заражения — половой и контактно-бытовой. Возможна передача ВПЧ от инфицированной матери к плоду. Человек может быть инфицирован несколькими типами ВПЧ.
К факторам, провоцирующим развитие ВПЧ-инфекции, относятся: ранее начало половой жизни, большое количество половых партнеров, сниженный иммунитет, применение оральных контрацептивов, авитаминозы, инфекции, передаваемые половым путем, курение и проживание в крупных городах.
Инкубационный период может длиться от 2 месяцев до 2-10 лет. Характерно скрытое течение заболевания, при котором отсутствуют клинические проявления, а при кольпоскопическом, цитологическом и гистологическом обследовании выявляется норма. В 30 % случаев в течение 6-12 месяцев может произойти избавление от вируса. Диагностика скрытой ВПЧ-инфекции осуществляется только методом ПЦР.
При острой инфекции возникают доброкачественные образования, такие как папилломы, бородавки, кондиломы. У детей папиллома-вирусы могут приводить к папилломатозу гортани. Поражение клеток трофобласта папиллома-вирусами чревато спонтанным абортом.
Объединение ДНК папиллома-вируса с геном клетки приводит к дисплазии/неоплазии (чаще всего в переходной зоне шейки матки).
Для чего используется исследование?
- Для выявления папиллома-вирусной инфекции высокого онкогенного риска.
- Для подтверждения/исключения персистирования определенного типа ВПЧ.
- Чтобы оценить степень канцерогенного риска у женщин с дисплазией эпителия шейки матки.
Что означают результаты?
Референсные значения: отрицательно.
Причины положительного результата
- Инфицирование папиллома-вирусом.
Причины отрицательного результата
- Отсутствие папиллома-вирусной инфекции.
- Низкое содержание ВПЧ в крови.
Выявление ДНК ВПЧ в исследуемом материале свидетельствует о наличии папиллома-вирусной инфекции. Если ДНК ВПЧ в исследуемом биоматериале не выявляется, то наличие папиллома-вирусной инфекции маловероятно.
- от 3 Lg до 5 Lg (ВПЧ/10 5 клеток) — клинически значимая вирусная нагрузка, нельзя исключить дисплазию, существует риск развития дисплазии
- > 5 Lg (ВПЧ/105 клеток) — клинически высокозначимая вирусная нагрузка, высокая вероятность наличия дисплазии
У всех ли ВПЧ вызывают рак?
Конечно же, далеко не у каждого человека вирусы вызывают рак.
Даже те, которые имеют высокий онкогенный риск.
В 90% случаев человек заражается, и самостоятельно излечивается в течение 1-2 лет.
Часто у него вообще нет никаких симптомов.
В иных случаях появляются кондиломы или изменения эпителия.
Но патологические очаги исчезают после элиминации вируса.
Тем не менее, в 10% случаев формируется хроническая персистирующая инфекция.
Именно она представляет наибольшую угрозу.
Чаще всего ВПЧ вызывает цервикальный рак у женщин.
Другие виды злокачественных опухолей, в том числе среди мужчин, являются большой редкостью.
К ним относятся новообразования:
- кожи;
- члена;
- ануса;
- прямой кишки;
- гортани;
- пищевода;
- мочевого пузыря.
Наблюдение требуется в первую очередь за женщинами.
У них вирус вызывает цервикальный рак, а это самая распространенная причина смерти от онкологических причин среди пациенток репродуктивного возраста.
Чаще в этот период встречается только рак груди.
Но от него умирают реже.
Коварство заболевания состоит в том, что выявляется оно поздно, а эффективность лечения низкая уже со 2 стадии.
Тем не менее, цервикальный рак распространен только в странах с низким уровнем медицины.
Это полностью контролируемое заболевание.
Рак не развивается на ровном месте.
Существует множество способов предотвратить его.
Для этого можно вовремя выявить ВПЧ, провести генотипирование, установить наблюдение в случае обнаружения вируса высокого онкогенного риска.
Уже на этом этапе медикаментозное лечение часто позволяет избавиться от инфекции и предотвратить предраковые процессы.
Если же выявлены предраковые заболевания, то они могут быть излечены.
И на всё это у женщины есть даже не годы – десятки лет.
Но если она никогда не ходит к гинекологу и не сдает анализы, то цервикальный рак появляется и развивается.
Хотя происходит это медленно, выявить болезнь вовремя шансов нет.
Потому что симптомы отсутствуют вплоть до того момента, когда патология становится неизлечимой.
Проявления ВПЧ-инфекции
В большинстве ситуаций при инфицировании ВПЧ в общем случае и, в частности, ВПЧ 16 симптомы у женщин, как и у лиц мужского пола, отсутствуют.
Иногда признаком инфекции могут служить бородавки, кондиломы (в случае присутствия вируса из группы низкого онкориска/неонкогенных).
При ВПЧ 16 заражении у женщин могут наблюдаться предраковые изменения на маточной шейке.
Это выявляется в процессе гинекологического осмотра.
Или профилактического, или, когда пациентка обратилась к врачу по иному поводу, например, с жалобами на необычные выделения.
Основными заболеваниями, вызываемыми ВПЧ 16, являются бовеноидный папулез и дисплазия разной степени.
При бовеноидном папулезе в области половых губ, лобка, паховой и околоанальной областях появляются плотные коричневатые, красноватые или телесного цвета папулы.
Они сливаются в крупные бородавчатые поверхности диаметром до 2 см.
Заболевание характеризуется хроническим, многолетним течением.
Озлокачествление развивается в 3% эпизодов (перерождается в плоскоклеточный рак), хотя чаще диагностируется самоизлечение.
Дисплазия маточной шейки относится к предраковым изменениям и требует серьезного отношения.
Поскольку такая патология из-за бессимптомности протекания может диагностироваться несвоевременно, в большинстве стран мира приняты программы скрининга рака цервикального.
Известно несколько классификационных подходов в отношении дисплазий и рака шейки.
Они основаны на результатах морфологических/цитологических изучений (исследований изменения клеток).
Согласно международной классификации болезней 10-го пересмотра различают:
- дисплазию легкую – незначительные разрастание и изменения эпителиальных клеток, часто подобное состояние обнаруживается при воспалительных процессах в области маточной шейки и устраняется после соответствующей противовоспалительной терапии
- дисплазию умеренную – изменения затрагивают весь нижний слой эпителия
- дисплазию тяжелую – поражается вся протяженность эпителия, заметно изменена структура клеток
- рак шейки (иначе карцинома плоскоклеточная) – обнаруживается при кольпоскопическом обследовании, подтверждается цитологически и гистологически
Умеренная и тяжелая дисплазия в большинстве эпизодов обусловлены именно воздействием вируса.
Признаки рака маточной шейки обнаруживаются лишь на последних стадиях и подразумевают:
- кровотечения межменструальные, нерегулярные, после полового контакта
- неприятный запах выделений
- дискомфорт во влагалище
- болевые ощущения с тазовой области, спине, ногах
- похудение
- утомляемость, отсутствие аппетита
- одностороннюю отечность ног
По мере прогрессирования болезни тяжесть проявлений может заметно нарастать.
ВПЧ генотипирование: что дает этот анализ
Это процесс определения типа вируса.
Он основан на определение участка ДНК, то есть, генотипа возбудителя.
Цели исследования:
- определение онкогенных типов вируса;
- установление степени онкогенного риска для конкретного пациента (определяется вирус в сочетании с другими методами исследования);
- определение терапевтической тактики.
В итоге проведения теста врач получает такую информацию:
- является ли персистирующий в организме человека вирус высокоонкогенным;
- какой это тип вируса (даже внутри группы онкогенных ВПЧ есть вирусы, которые в большей или меньшей степени повышают вероятность рака);
- в какой концентрации он содержится (если вирусов мало, вполне вероятно, что организм вскоре избавиться от них самостоятельно).
ВПЧ ВКР генотипирование
ВКР расшифровывается как высокий канцерогенный риск.
Таким образом, это исследование отличается тем, что определяются только высокоонкогенные вирусы.
К примеру, вы не получите заключение: обнаружен 6, 11 или другой тип с низкой онкогенностью.
На них тестирование может не проводиться.
Ситуации, когда требуется типирование именно на вирусы ВКР:
- сниженный иммунитет (в том числе по причине ВИЧ);
- «плохие» результаты анализа на онкоцитологию;
- клинические признаки цервикальной дисплазии.
То есть, анализ делают, когда риск онкопатологии у конкретного пациента оценивается как высокий.
При этом может быть неважным, присутствуют ли другие вирусы из числа тех, которые почти никогда не вызывают рак.
ВПЧ генотипирование: количественный анализ
Врачу мало знать только тип вируса.
Необходима также информация о его количестве.
Единицей измерения служит количество ДНК в 100 тысячах эпителиальных клеток.
Их должно быть меньше 10 в 5 степени.
Если этот порог достигнут или превышен, такая концентрация вируса считается клинически значимой.
Онкогенные вирусы в таком количестве провоцируют интраэпителиальную неоплазию.
А затем на её фоне развивается рак.
Зачем врачу знать количество вируса:
- чтобы понять, опасен ли он;
- дать прогноз дальнейшему развитию инфекции;
- оценить результативность лечения;
- спланировать дальнейшее ведение пациентки (в том числе методом наблюдения, когда периодически проводятся осмотры и взятие анализов).
Анализ проводят на 10-14 высокоонкогенных типов.
Для определения количественных показателей проводится ПЦР в реальном времени.
Она дает возможность дифференцировать клинически значимую концентрацию вируса от разрешающихся или транзиторных форм инфекции.
Кому рекомендовано генотипирование ВПЧ?
В нашей стране типирование назначается не с профилактической целью, как на Западе, а по медицинским показаниям.
Многие женщины не проходят скрининг.
Поэтому частота цервикального рака и смертность от него в стране остается высокой.
Обычно женщины приходят к врачу, если у них появились бородавки на гениталиях, либо были получены патологические результаты цитологического исследования цервикального мазка.
Но большинство международных организаций рекомендуют делать анализ на ВПЧ даже без каких-либо симптомов или предварительных исследований.
То есть, проводить его всем подряд поголовно.
Согласно рекомендациям FIGO исследование на ВПЧ проводят 1 раз в 5 лет до возраста 65 лет.
ВОЗ рекомендует делать анализ минимум 1 раз всем женщинам, пребывающим в возрасте 30-49 лет.
Необходимость обследования на ВПЧ предусмотрена и российским приказом Минздрава 572н от 1 ноября 2012.
Непосредственно генотипирование (определение точного типа ВПЧ) не является обязательным.
Но по возможности рекомендуется проводить типирование хотя бы на 16 и 18 типы как на самые опасные среди всех существующих.
Допускается также применение альтернативных исследований.
Широко используется Digene-тест.
Он основан на гибридизации участков ДНК с РНК зондами.
В дальнейшем они улавливаются антителами с флуоресцентной меткой.
При позитивном результаты выдаются количественные показатели.
Существуют также тесты, основывающиеся на обнаружении РНК ВПЧ.
В частности, тест Aptima способен обнаружить 14 высокоонкогенных типов с частичным генотипированием.
Чем опасен папиллома-вирус?
В ходе многолетних исследований ВОЗ найдена связь между этим вирусом и раком. Поэтому в медицине выделяются штаммы (разновидности вируса) неонкогенного и онкогенного характера. Это означает, что инфекция может быть как безобидной, так и нести в себе серьезную угрозу для здоровья.
Вот неполный список злокачественных опухолей, вызываемых ВПЧ:
- рак шейки матки;
- рак наружных половых органов;
- рак прямой кишки;
- рак гортани и глотки.
Поэтому не следует откладывать визит к врачу, если на слизистых оболочках, в области гениталий и на коже обнаружены высыпания, бородавки и другие новообразования.
Что делать, если выявлены опасные типы ВПЧ?
Риск обнаружения опасных типов ВПЧ у отдельно взятого человека невысокий.
У большинства людей никакие разновидности этого вируса не выявляются вообще.
Если же пациент инфицирован, то с высокой вероятностью это неопасный тип ВПЧ.
Низкоонкогенные разновидности встречаются гораздо чаще.
Если же вам не повезло, и у вас обнаружили высокоонкогенный ВПЧ, нужно смотреть на его количество.
В случае, когда оно небольшое, лечение не требуется.
Скорее всего, ваш организм уже начал избавляться от вируса, и вскоре он перестанет определяться.
Хуже, если концентрация его высокая.
В таком случае необходимо следующее:
- дополнительные анализы;
- лечение;
- динамическое наблюдение.
У пациентки берут мазок на онкоцитологию.
Чаще всего это исследование проводят не после генотипирования ВПЧ, а одновременно с этим тестом.
По результатам этих двух анализов может быть принято решение о необходимости кольпоскопии.
Она нужна для выявления участков измененного эпителия (предраковых процессов).
В свою очередь результаты кольпоскопии (осмотра цервикса) могут потребовать проведения биопсии.
Это процедура, при которой берут фрагмент ткани и отправляют на гистологическое исследование.
По его результатам может быть диагностирована как злокачественная опухоль, так и предраковый процесс 1-3 стадии.
1 стадия обратима, тогда как на 2-3 требуется «прижигание», чтобы предотвратить рак.
Но развиваются предраковые процессы очень медленно.
Если вовремя провести противовирусное лечение, то вирус исчезает из организма, и эпителий шейки матки восстанавливается.
Пациентов обязательно наблюдают.
Они сдают анализы раз в полгода, чтобы оценить, увеличивается или уменьшается концентрация вируса.
Для его элиминации используют противовирусные и иммуномодулирующие препараты.
Лечение ВПЧ инфекции
Какой врач лечит ВПЧ 16 у женщин?
Лечением ВПЧ-инфекции может заниматься врач-гинеколог, онколог, инфекционист, венеролог.
Важно понимать, что случайное обнаружение вируса при отсутствии клинических изменений не является показанием для проведения терапии.
Только в случае выявления высокоонкогенных вирусов (ВПЧ 16) у женщин врач решает, что делать дальше.
Нужно ли участить прохождение диагностических обследований и осмотров или назначить дополнительные исследования.
Только специалист может установить, нужно ли лечить ВПЧ 16 у женщин, учитывая наличие/отсутствие индуцированных вирусом изменений.
В ситуации с ВПЧ важно доверять свое здоровье только высокопрофессиональным специалистам, знакомым с международными протоколами ведения инфекции.
Особенно это существенно при инфицировании ВПЧ 16, провоцирующего злокачественные патологии у женщин (отзывы в интернете, от знакомых помогут определиться с учреждением и врачом).
На сегодняшний день у женщин лечение ВПЧ 16 основано на удалении атипически измененного эпителия.
Следует понимать, что при наличии инфекции у женщин препараты, уничтожающие сам вирус, отсутствуют на сегодняшний день.
Любая международная схема лечения ВПЧ 16 не предусматривает включение каких-либо противовирусных средств.
В то же время проводится специфическое лечение ВПЧ 16, при котором рекомендуются к приему у женщин препараты с иммуномодулирующей и противовирусной активностью.
Считается, что такие средства мобилизуют иммунитет на предмет борьбы с вирусом.
Подобные средства не прошли достаточной проверки эффективности клиническими испытаниями.
Соответственно, нет достоверных данных о проценте излеченности.
Несмотря на это, многие пациенты отмечают существенное улучшение самочувствия на фоне их использования.
К средствам иммунокорригирующей терапии от ВПЧ 16 у женщин относят:
- с человеческим рекомбинантным интерфероном или его индукторами свечи (Виферон, Генферон), Изопринозин, Циклоферон и др.
- с иммуностимулирующим эффектом ‑ Ликопид, Полиоксидоний и пр.
- витамины группы В, омега-кислоты и БАДы
Зачастую перед назначением медикаментозной схемы лечения рекомендуется проведение анализа иммунного статуса (иммунограммы).
С определением показателей активности моноцитов, нейтрофилов, функции лимфоцитов, уровней иммуноглобулинов, CD16+, CD8+, CD4+ и других.
К сожалению, для многих препаратов не получены данные по безопасности применения, осложнениям и рецидивам после использования.
Поэтому рекомендуется воздержаться от их применения лицам с:
- аутоиммунными заболеваниями
- злокачественными образованиями (при раке шейки матки могут назначаться только после завершения хирургического лечения)
- аллергическими реакциями
- бронхиальной астмой и др.
Что касается общепринятого в международном медицинском сообществе подхода к ведению ВПЧ-инфекции, то здесь позиционируются следующие моменты:
- Не существует лекарственных средств для удаления вируса из организма, но при этом вероятность самоизлечения очень высока, особенно в молодом возрасте
- При отсутствии изменений клеточных структур и выявлении вируса из группы высокого онкогенного риска проводится более частое и тщательное наблюдение за пациенткой
- При обнаружении изменений, вызванных активностью вируса, проводится терапия, направленная на устранение патологических преобразований
При бовеноидном папулезе, обусловленном ВПЧ 16 типа, проводят удаление образований методами:
- иссечения по Мохсу
- лазерной терапии
- криодеструкции
- электрокоагуляции
- местным наложением мазей с цитостатиками (5-фторуроциловой, проспидиновой, фторофуровой)
- внутриочаговым введением интерферона
- приема внутрь капсул Неотигазона
Предраковые состояния и первые стадии рака маточной шейки хорошо поддаются лечению.
Измененные клетки удаляют методом криотерапии.
При дисплазиях проводятся органосохраняющие операции: конизация шейки скальпелем, электрохирургически, лазером с предварительным канальным выскабливанием.
При локализованных формах опухоли проводят хирургическое лечение, при распространенном процессе – лучевая и химиотерапии.
С учетом того, что устранение результата активности вируса не удаляет сам возбудитель инфекции.
Риск рецидива патологических изменений остается, что, в свою очередь, требует дальнейшего наблюдения за пациенткой.
Кроме того, нельзя исключить и вероятность реинфицирования ВПЧ.
После реализации любого варианта лечения рекомендуется проведение контрольных анализов.
Поскольку существует вероятность самопроизвольного устранения вируса в течение 2-х лет от момента заражения.
Отдельную проблему представляют лица с ВПЧ на фоне ВИЧ-инфицирования.
Доказано, что риск развития онкологии у таких женщин выше, как и риск собственно заражения ВПЧ.
Хотя чаще выявлялось первичное инфицирование ВПЧ, что связано с большей распространенностью этого вируса.
Причем чем хуже иммунный статус пациентки, тем выше вероятность возникновения у нее ВПЧ-индуцированного рака.
Поэтому лицам с ВИЧ-статусом рекомендуется более частое прохождение исследований на ВПЧ.
Лечение проводится теми же методами, что и у неинфицированных ВИЧ, с проведением дополнительно специфической терапии, направленной на подавление активности вируса иммунодефицита.
Можно ли делать ВПЧ без генотипирования?
Конечно же, делать такой анализ можно.
Он тоже достаточно информативен.
Генотипирование ВПЧ цены имеет более высокие, и такие затраты не всегда нужны.
В любом случае в результате проведения теста будет определен тип или нет, врач узнает, присутствует ли в организме папилломавирус ВКР.
Если он есть, и если присутствует в большой концентрации, в любом случае пациенту необходимо:
- лечение;
- динамическое наблюдение.
И это нужно, вне зависимости от конкретной разновидности обнаруженного вируса.
